Искусственное осеменение. Организация и техника искусственного осеменения кобыл

Искусственное осеменение. Организация и техника искусственного осеменения кобыл
Искусственное осеменение. Организация и техника искусственного осеменения кобыл
  • 5. Косячное, вольное и гаремное (классное) спаривание
  • 6. Оборудование пункта искусственного осеменения коров
  • 7. Организация работы пункта искусственного осеменения. Выявление коров в охоте
  • 8. Преимущества искусственного осеменения животных
  • 9. Выращивание самцов-производителей для использования в искусственном осеменении. Особенности кормления и содержания
  • 10. Искусственная вагина. Особенности устройства вагин для самцов разных видов
  • 11. Устройство и подготовка к использованию искусственной вагины
  • 12. Особенности взятия спермы у самцов разных видов
  • 13. Взятие спермы у быка
  • 14. Взятие спермы у жеребца, хряка
  • 16. Добавочные половые железы, их значение
  • 17. Сперма, ее химический состав, свойства
  • 18. Сперма. Строение сперматозоида
  • 19. Сперма. Свойства сперматозоидов
  • 20. Спермоагглютинация, ее причины и профилактика
  • 21. Дыхание и гликолиз сперматозоидов
  • 24. Разбавление спермы. Разбавители. Преимущества разбавления спермы
  • 25. Виды разбавителей спермы, их химический состав и свойства
  • 26. Криоконсервация спермы. Краткая история и значение метода
  • 27. Криоконсервация спермы. Методика криоконсервации
  • 28. Влияние паратипических факторов на воспроизводительную функцию самок
  • 29. Влияние генетических факторов на воспроизводительную функцию самок
  • 30. Стимуляция половой функции самок
  • 31. Синхронизация половой функции самок
  • 32. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro)
  • 34. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro). Капацитация сперматозоидов
  • 36. Маноцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки
  • 37. Визоцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки
  • 39. Сперматогенез
  • 40. Искусственное осеменение овец и коз
  • 41. Искусственное осеменение свиней
  • 42. Биотехнология нативной спермы. Оценка сперматозоидов по морфологическим признакам
  • 43. Методика замораживания спермы и хранения ее в жидком азоте
  • 44. Искусственное осеменение птиц
  • 45. Оборудование лаборатории для искусственного осеменения пчел. Взятие спермы у трутня. Осеменение матки
  • 47. Овогенез.
  • 48. Ректоцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки
  • 49. Искусственное осеменение самок северных оленей (важенок)
  • 50. Оттаивание и оценка качества размороженной спермы
  • 51. Естественное осеменение у пчел
  • 52. Искусственное осеменение пчелиных маток
  • 53. Визуальная и микроскопическая оценка спермы. Методика исследований
  • 54. Воздействие на сперматозоиды высокой и низкой температур, йода.Методика исследований
  • 55. Виды патологических форм сперматозоидов. Соотношение нормальных и патологических форм
  • 56. Искусственное осеменение кобыл
  • 57. Оценка концентрации и активности (подвижности) сперматозоидов
  • 58. Воздействие на сперматозоиды осмотического давления (гипотонический и гипертонический растворы). Методика исследований
  • 59. Организация искусственного осеменения
  • 56. Искусственное осеменение кобыл

    Подготовка к осеменению кобылы всегда сопровождается дополнительными мероприятиями по предупреждению травматизма. Поэтому для начала кобылу заводят в станок или удерживают за повод, кроме того, во время введения спермы кобыле поднимают переднюю конечность, чтобы она не могла ударить задней. Предварительно корень хвоста забинтовывают. Конюх отводит хвост кобылы в сторону и обмывает наружные половые органы из кружки Эсмарха раствором фурациллина 1:5000. осеменяют кобыл двумя способами: визоцервикальным и маноцервикальным. Сперму вводят непосредственно в матку (на глубину 10-20 см) применяется резиновый, эбонитовый или полистероловый катетер.

    Искусственное осеменение кобыл может быть проведено двумя способами .

    Для маноцервикального способа используют резиновый и полистероловый катетеры. Подготовленную руку ветспециалист вводит во влагалище кобылы, конец катетера, продвигает через шейку в тело матки; помощник поднимает шприц или ампулу и вводит сперму.

    Для визоцервикального способа осеменения используют как эбонитовый, так и полистероловый катетер конструкции ВНИИ коневодства. Катетер представляет собой трубку длиной50 сми толщиной0,6 см, один конец которой расширен в виде головки. Катетер соединяют со шприцем или ампулой резиновой муфтой с хомутиком. Катетер используют одновременно с влагалищным зеркалом, которое стерилизуют и увлажняют 0,9% раствором NaСl.

    Осеменяют кобыл свежеполученной или сохраненной при t 2-4ºС в течение 3 суток или размороженной. При оттаивании спермы, замороженной в алюминиевых пакетах, их быстро переносят пинцетом из жидкого азота на 1 минуту в водяную баню t 40ºС. Доза свежеполученной спермы -25-30 мл. В дозе должно быть не менее 150-300 млн спермиев с ППД. Активность свежеполученной спермы не ниже 6 баллов, оттаянной – 2 балла.

    Сперму вводят только подогретой до t 30-35ºС. Осемененных кобыл через 8-9 дней проверяют жеребцом-пробником на наличие половой охоты. Через 35-40 дней после осеменения кобыл проверяют на жеребость ректальным методом.

    57. Оценка концентрации и активности (подвижности) сперматозоидов

    Подсчет количества сперматозоидов в семенной жидкости - важнейший компонент базового анализа спермы. Концентрация сперматозоидов - количество сперматозоидов на единицу объема семенной жидкости. Обычно этот показатель выражают в миллионах сперматозоидов на миллилитр (млн/мл). Концентрация сперматозоидов сама по себе не отражает общего количества сперматозоидов в эякуляте. Число сперматозоидов подсчитывают с учетом концентрации и объема эякулята. Разработано два метода определения концентрации спермы. Оба включают подсчет определенного количества разжиженной спермы в специальном резервуаре. Независимо от выбранного метода, необходимо удостовериться, что образец спермы хорошо перемешан. Для этого контейнер осторожно взбалтывают, однако не следует энергично встряхивать сосуд. Концентрацию сперматозоидов в образце можно определить методом Нейбауэра с использованием гемоцитометра. Гемоцитометр Нейбауэра - один из специально разработанных резервуаров для подсчета, применяемых на данный момент. С помощью нагнетательной пипетки оба резервуара наполняют хорошо перемешанной разбавленной спермой. Резервуар оставляют на 5 мин для оседания клеток. Подсчитывают только отдельные сперматозоиды на сетке. Изолированные головки, хвосты и другие клетки зародышевой линии должны быть отмечены, но их не подсчитывают. После подсчета сперматозоидов с одной стороны резервуара производят подсчет на второй решетке. Затем находят среднее значение. Если отдельные значения отличаются от среднего более чем на 5%, следует провести тест повторно. Если оба полученных при подсчете значения засчитываются, среднее значение делят на вычисленную площадь поверхности и умножают на коэффициент разбавления, таким образом находят концентрацию сперматозоидов в первоначальном образце спермы (млн/мл). Затем можно подсчитать количество сперматозоидов, умножив значение концентрации сперматозоидов на объем эякулята. Счетная камера Маклера (Sefi Medical Instruments, Haifa, Israel) - специальный прибор, разработанный для быстрого анализа спермы. С момента изобретения в 1980 г. счетная камера Маклера получила широкое распространение и используется теперь во многих лабораториях. Главное преимущество камеры Маклера перед гемоцитометром Нейбауэра - отсутствие необходимости разбавлять образец спермы (за исключением случаев крайне высокой концентрации). Кроме того, подвижность и прогрессивно-поступательное движение можно оценивать во время вычисления концентрации сперматозоидов. Хотя камера Маклера упрощает определение концентрации при анализе спермы, данный метод уступает традиционной гемоцитометрии в точности и имеет тенденцию к получению ошибочных результатов.

    Понятие «-зооспермия» относится к наличию сперматозоидов в эякуляте. Пациентов с концентрацией сперматозоидов менее 20х106/мл классифицируют как страдающих олигозооспермией. Азооспермия - полное отсутствие сперматозоидов в эякуляте. Диагноз азооспермии ставят лишь после микроскопического подтверждения отсутствия сперматозоидов в осадке после центрифугирования неразбавленного образца спермы

    Система классификации ВОЗ за 1999 г. выделяет четыре категории сперматозоидов: категория А включает сперматозоиды с быстрым прогрессирующим движением; к категории В относят медленные или инертные сперматозоиды; категория С - сперматозоиды с непрогрессирующим движением; категория D - неподвижные сперматозоиды. Процентное соотношение категорий сперматозоидов регистрируют. В нормальном образце спермы содержится, по меньшей мере, 50% подвижных сперматозоидов, у большинства из них наблюдают хорошее прогрессирующее движение (модальный класс >2, классы А и В ВОЗ). Астенозооспермию диагностируют при количестве сперматозоидов с хорошей подвижностью менее 50%.

    26«Лошадь гораздо щедрее, чем человек, одарена инстинктами и чувствами. Слышит лошадь лучше кошки, обоняние тоньше, чем у собаки, она чувствительна к ходу времени, к перемене погоды… Нет ей равного на Земле животного» А. И. Куприн

    Спаривание лошадей — неотъемлемая часть коневодства

    Спаривание лошадей – это естественный физиологический процесс воспроизводства себе подобных, размножение для сохранения вида. Коневодство рассматривает это как неотъемлемую часть селекции для выведения и совершенствования пород. При осеменении сперма самца извергается в половые органы самки. Происходит оплодотворение яйцеклетки, зарождается новая жизнь.

    Естественное размножение

    Процесс воспроизводства длится с весны до середины года. Табун состоит из одного коня и нескольких кобыл, не больше 12, численность регулируется природой для качественного оплодотворения. Вожак охраняет стадо, защищает, покрывает лошадей. Одна из них, альфа-кобыла, становится главной среди остальных. Она выбирает места для пастбища и руководит группой. В процессе размножения пользуется приоритетом среди других кобыл. Часто вожак метит лошадей из своего стада. Мужские индивидуумы всех видов парнокопытных всегда готовы к коитусу, женские — только в период «охоты». Случка лошадей происходит до нескольких раз в сутки. Иногда конь под действием сексуального желания пытается покрыть не играющую, не готовую к воспроизводству потомства кобылу. Оплодотворения не будет, но провоцируется преждевременная течка. На воле случка лошадей контролируется на генном уровне, сохраняя вид и соотношение внутри популяций.

    Кобылы готовы к случке только в период охоты

    Предвестники охоты

    Жеребцы чувствуют приближение охоты у кобыл. В этот период предтечки (проэструс) самцы обхаживают самок, уделяя им повышенное внимание: пощипывают кобылу за шею, обнюхивают половые органы. Когда начинается течка и становится возможным оплодотворение, кобыла приподнимает хвост, расставляет задние ноги, слегка наклоняется к земле, у нее открывается вульва. При течке (экструс) происходит выделение слизи из влагалища, возможно частое мочеиспускание, «мерцание». Выделяемый из половых органов запах привлекает самцов. Молоденькие кобылицы, впервые ощущающие необычную для них потребность в близости, становятся тихими. Период охоты длятся от 3 до 1 дней. Принято кобылу покрывать на следующий день после начала течки для получения максимальной гарантии оплодотворения.

    В случае неудачи сохраняется возможность повторить случку, если кобыла еще «играет».

    Почуяв приближение охоты, жеребец начинает ухаживать за кобылой

    Процесс осеменения

    В процессе ухаживания член напрягается и выходит из препуциального отверстия. Конь запрыгивает на кобылу, охватывает ее передними ногами, делает садку. Эрегированный член входит во влагалище кобылы, происходит извержение семени. Коитус длится от 12 до 16 секунд. При хорошем стечении обстоятельств наступает оплодотворение.

    Молодые самцы иногда терпят неудачу. Из-за своей неопытности они допускают ряд ошибок: запрыгивают не сзади, а сбоку, часто суетливы, допускают раннее семяизвержение. Учатся и набирают опыт они быстро. На следующий раз жеребец кроет самку достаточно легко.

    Овуляция возобновится, если не произошло оплодотворение. После рождения потомства охота у кобыл наступит через 8-10 дней.

    Возраст для спаривания

    При подготовке к воспроизводству важную роль играет тщательный подбор партнеров. Обычно до двух лет молодая кобылка не подпускает коня сама, а когда наступает период половой активности, ее возраст приближается к трем годам.

    Половое созревание у кобыл приходится на третий год жизни

    Как готовят к случке

    Для спаривания используются кандидаты с хорошей работоспособностью и внешностью, отличающиеся высокой породистостью, хорошей наследственностью. Показатели самки могут быть ниже показателей самца. За 4-6 недель до предполагаемого осеменения в рацион вводятся дополнительные корма, обеспечивается улучшенный уход, а за несколько дней до него проверяется сперма коня, и осматриваются воспроизводящие органы кобылиц.

    Подбор пород

    Лошади для размножения тщательно подбираются. От этого зависят данные будущего потомства. Самку выбирают такого роста, как производитель, или немного крупнее, но только не маленькую и хрупкую по сравнению с ним. Для получения чистой породы запрещается смешивать породистых животных одного вида с другим. Конь обязательно должен быть той породы, которую вы стремитесь получить. Для племенного разведения используются от этой связи только кобылицы, пока не будет подтверждена порода. Повторив процедуру с обыкновенной лошадью восемь раз, вы можете сказать, что получили чистое потомство. Выбираются здоровые и красивые родители с присущими породе чертами.

    Смешивать ценные породы при спаривании запрещено

    Какая бывает случка

    При случке лошадей используют разные методы. Наиболее распространенными считаются ручной, варковой и косячный способы. Они такие же, как в природе. Человек является лишь наблюдателем и корректором. Подбираются наиболее подходящие друг другу лошади, определяются признаки, которыми должно обладать потомство, составляются пары.

    В сельских хозяйства и небольших фермах обычно применяют ручную случку из-за ее простоты, дешевизны, хорошего результата. Жеребцы оплодотворяют кобыл с высокой вероятностью зачатия (90-95%), при правильном уходе вырастает прекрасное, здоровое потомство.

    1. Использовать спокойное, не шумное место.
    2. Кобыла должна установлена так, чтобы обеспечить к ней легкий доступ, желательно немного приподнять зад.
    3. Убрать подковы, если кобылка строптивая — воспользоваться случным поясом, чтобы защитить жеребца

    Накануне процесса случки лошадей надо немного изучить их повадки. У каждой из них свой характер. Важно, чтобы они понравились друг другу. Пусть принюхаются, освоятся, почувствуют себя в безопасности.

    Жеребец и кобыла должны привыкнуть друг к другу

    Варковая случка и косячная случка применяются в табунах. Только варковая происходит в загоне. Племенной конь остается с группой кобыл (от трех до семи). Он самостоятельно выбирает партнерш для спаривания.

    После случки кобыл выводят в табун, а жеребец некоторое время набирается сил и присоединяется к стаду.

    Косячная случка отличается тем, что в табун отбирается большее количество лошадей (от двадцати до двадцати пяти). Племенной конь находится с ними на пастбище весь брачный период. Лошади относительно свободны в выборе. Оплодотворяемость 90-95%.

    Искусственное осеменение

    Крупные фермы и конезаводы используют искусственное оплодотворение. Техники-осеменаторы вводят разбавленную сперму во влагалище кобылы. Отбор лошадей происходит стандартным способом. Преимущества данного способа.

    Эффективно используется сперма коня-производителя. Одной разбавленной дозой о осеменяется до двадцати лошадей, а за сезон до пятисот.

    1. Не истощается племенной самец.
    2. Собранную сперму замораживают в жидком азоте, предварительно отобрав ее по специальным параметрам (высокая подвижность спермиев и определенная их концентрация в разбавленном состоянии).
    3. Сохраняется банк спермы, позволяющий длительное время использовать генетические данные наиболее породистых коней для оплодотворения.
    4. Не передается инфекция.

    Случка лошадей не только важный процесс воспроизводства вида, но и одна из главных составляющих в коневодстве для разведения чистокровных лошадей, усовершенствования существующих и выведения новых пород. Наработана огромная база знаний, используя которые добиться хороших результатов для появления здорового потомства.

    Для осеменения кобылу заводят в станок или поднимают ее переднюю ногу, чтобы она не могла ударить задней. Наружные половые органы кобылы обмывают тампоном, смоченным в чистой воде.

    Обычно кобылам при осеменении вводят в матку 30 мл семени, а кобылам крупным и только что выжеребившимся дозу семени увеличивают до 35-40 мл. Минимальная доза равна 20 мл. .

    Осеменение кобыл производится до овуляции при третьей и четвертой стадиях созревания -фолликула (Ф3 и Ф4). Осемененных кобыл проверяют ректально через 24-48 часов. Если овуляция еще не наступила, осеменение повторяют. После овуляции осеменение не производят.

    На пунктах, где еще не освоен ректальный метод контроля состояния яичников, осеменение кобыл проводят при хорошем внешнем проявлении охоты. Осеменение повторяют через каждые 24---48 часов до затухания признаков охоты.

    Для искусственного осеменения кобыл наиболее широко применяется мягкий резиновый катетер, представляющий собой толстостенную резиновую трубку с узким внутренним каналом. Суженный конец катетера вводят в матку, а широкий соединяют со стеклянным шприцем емкость которого 30 мл: Катетер рукой вводят во влагалище кобылы, нащупывают шейку матки и направляют конец его в канал шейки матки на глубину 10-12 см. Затем к катетеру присоединяют шприц с семенем и, нажимая на поршень, вводят семя в матку кобылы.

    Для осеменения кобыл можно также пользоваться эбонитовым катетером конструкции Института коневодства, образца 1952 г. Он представляет собой тонкую эбонитовую трубку длиной 50 см и толщиной 0,6 см. Один конец ее расширен в виде головки. Внутренний канал трубки имеет диаметр 1 мм. Катетер прочно соединяется со шприцем посредством специальной резиновой муфты или же при помощи обрезка резинового катетера длиной 2,5-3 см.

    Осеменение этим катетером производится через зеркало-расширитель, которое предварительно обеззараживают обжиганием на огне или протиранием всей поверхности ветвей зеркала тампоном, пропитанным дезинфицирующим раствором.

    Зеркало смачивают кипяченой водой, вводят во ^влагалище, раскрывают и держат левой рукой так, чтобы была хорошо видна шейка матки. Правой рукой берут шприц с семенем и присоединенным к нему эбонитовым катетером. Катетер осторожно вводят через зеркало в канал шейки матки на глубину 10-12 см, нажимают на поршень шприца и вводят семя в матку. Осеменение посредством эбонитового катетера техник по искусственному осеменению может проводить без помощника. Этот способ применяют в хозяйствах, неблагополучных по заразным заболеваниям, так как эбонитовый катетер и зеркало легко поддаются дезинфекции.

    Ампульный метод служит для осеменения кобыл перевезенным семенем непосредственно в хозяйствах. Стеклянная ампула служит для перевозки семени и одновременно заменяет шприц. С узкого конца ампулы снимают колпачок и присоединяют ее к эбонитовому или резиновому катетеру, введенному в шейку матки кобылы. Для соединения ампулы с эбонитовым катетером применяют специальную резиновую муфту или же обрезок мягкого резинового катетера. Из ампулы вынимают пробку, и семя самотеком выливается через катетер в матку. Если семя не вытекает, катетер немного отводят назад, чтобы конец его не упирался в слизистую оболочку матки.

    ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ

    Искусственное осеменение - это процесс введения в половые пути самки определенной дозы спермы с помощью специальных инструментов.

    Преимущества искусственного осеменения

    А) значительно сокращается объем и количество спермы для оплодотворения одной самки.

    Б) сперму ценных производителей можно долгосрочно сохранять и использовать в течение нескольких десятилетий.

    В) возможно координировать племенное дело во всех регионах

    Г) за счет отбора и подбора родительских пар направленно получать желаемые изменения и признаки.

    Эффективность искусственного осеменения проявляется лишь в сочетании с полноценным кормлением, правильным содержанием и эксплуатацией.

    Физиологические основы искусственного осеменения

    Техника искусственного осеменения самок животных разных видов основаны на особенностях строения половых органов. Кроме этого, особое значение приобретает скорость перемещения спермы, зависящая от состояния самки. Чем ближе момент овуляции, чем выше нервный и гормональный тонус половых путей, тем быстрее спермии перемещаются.

    Фолликулярная жидкость при овуляции поступает сначала в яйцепровод, затем в матку и приводит спермии в активное состояние. В половых органах коров, овец и крольчих спермии сохраняют жизнеспособность в среднем 36-48 час, свиней - 24-48 час, у кобыл до 90 час, у собак до 6-7 суток. Спермии птиц в отличие от спермиев животных сохраняются до 35 дней и более.

    Время осеменения самок

    После овуляции яйцеклетки в яйцепроводах сохраняют способность и оплодотворяющую способность к оплодотворению всего лишь 2-6 час, у собак 2-3 дня. У коров и телок фолликулы (в отличие от других) овулируют через 10-15 час после окончания охоты, поэтому их осеменяют в середине и в конце охоты. У кобыл, овец, коз, свиней и собак фолликулы овулируют во вторую половину охоты спонтанно. Характерная особенность крольчих провоцированная овуляция: для разрыва фолликулов необходимо спаривание. У домашних птиц яйца образуются спонтанно вовремя всего периода яйцекладки (сезон).

    Способы искусственного осеменения самок. При искусственном осеменении введение спермы имитирует в основном у всех самок по маточному типу. При осеменении коров (телок), овец, коз и крольчих сперму вводят в шейку матки (цервикальный метод), где наиболее благоприятные условия выживаемости спермиев. При осеменении кобыл, свиноматок и собак сперму вводят непосредственно в матку (тело матки).

    Ветеринарно-санитарные правила при искусственном осеменении

    Для того чтобы предотвратить опасность распространения заболеваний, необходимо строго соблюдать следующие правила:

    А) техники по искусственному осеменению животных в чистых халатах, колпаках и косынках, а в неблагополучных по инфекционным болезням хозяйствах в фартуках и резиновых сапогах

    Б) инструменты для искусственного осеменения, приборы, посуда и оборудование должно быть стерильным

    В) шприцы - катетеры стерилизуют в разобранном виде: кипятят 15-20 минут при закрытом стерилизаторе.

    Г) влагалищное зеркало можно дезинфицировать с помощью 96% этанола с последующим обмыванием стерильным раствором 1% NaCl.

    Д) перед искусственным осеменением самок (коров, телок, кобыл, овец, коз, свиноматок) фиксируют в специальных станках (или стойлах). Наружные половые органы обмывают чистой водой из кружки Эсмарха, орошают раствором фурациллина (1:5000), фуразолидона (1:1000), насухо вытирают, раскрывают половые губы самок и вводят стерильные инструменты. Влагалищное зеркало обязательно предварительно увлажняют теплым стерильным 1% раствором хлорида натрия.

    Искусственное осеменение коров

    Коров и телок осеменяют только при наличии у них половой охоты дважды: первый раз сразу после выявления охоты и второй раз - через 10-12 часов (если охота продолжается). Допускается и однократное осеменение, но только при ректальном контроле созревания фолликулов в яичниках или выявления охоты быком-пробником. Иногда практикуют двукратное осеменение в течение одной охоты с интервалом 10-15 мин.

    В настоящее время применяют 4 способа искусственного осеменения коров и телок: влагалищный - сперму вводят во влагалище или на шейку матки, визоцервикальный - с использованием влагалищного зеркала, ректоцервикальный и маноцервикальный.

    При осеменении коров и телок свежеполученной спермой работают в лаборатории или манеже при t 18-20ºС. Сперму набирают в теплый шприц-катетер или осеменительную полистироловую пипетку, Катетер опускают во флакон со спермой и медленно набирают ее в шприц. Затем, повернув шприц катетером вверх, движением поршня вниз собирают всю сперму из канала катетера в цилиндр шприца. Не изменяя положения шприца, поршень осторожно двигают вверх, вытесняя из цилиндра пузырьки воздуха до появления на конце катетера капли спермы, которую наносят на предметное стекло, чтобы вторично оценить активность спермиев. В том случае, если качество спермы не снизилось, приступают к осеменению.

    Если коров осеменяют спермой, охлажденной до 0-4 ºС, то ее набирают в предварительно нагретый шприц-катетер, для чего последний несколько раз промывают стерильным 1% раствором NaCl или 1% раствором бикарбоната натрия t 42-45ºС. В этом случае t шприца = 35-40ºС. А набранной в него спермы - 30-35ºС

    Гранулированную сперму, находящуюся в ампулах или флаконах, после оттаивания сразу помещают в гнезда штатива, изготовленного из поролона. Гранулы спермы объемом 0,5 мл размораживают в стерильном фоаконе. Стерильным карнцангом из сосуда Дьюара достают две гранулы (доза) и помещают в теплую воду в термосе при t 40-42ºС, вращая флакон до полного оттаивания двух гранул. При объеме грану 0,5 мл время оттаивания двух гранул составляет 1,5-2 мин. Нельзя в один помещать несколько доз, т.е.4, 6, и более гранул, т.к нарушается режим размораживания. Снижается и оплодотворяющая спосбность спермы.

    Сперму, замороженную в облицованных гранулах оттаивают в термостате при t воды 38-40ºС в течение 8-10 сек.

    После оттаивания спермы облицовку насухо протирают стерильной салфеткой и проверяют на герметичность путем легкого надавливания. Убедившись, что герметичность облицованной гранулы не нарушена, последнюю помещают в корпус одноразового инструмента для маноцервикального способа введения, затем толкателем продвигают ее к переднему краю корпуса до упора. Через выходное отверстие корпуса инструмента стерильной иглой прокалывают оболочку гранулы и вводят сперму в половые пути коровы.

    Если используются гранулы концентрированной спермы объемом 0,1-0,2 мл, то ее размораживают в стерильном 2,9% растворе цитрата натрия в ампулах объемом 0,8-1 мл, при этом помещая в теплую воду (40-42ºС) на 5-8 сек. В одной ампуле оттаивают только одну гранулу. Ампулу с размороженной спермой сразу вынимают из сосуда с водой и ставят на стол в гнезда штатива при комнатной температуре 18-20ºС или помещают в термос.

    Когда сперма, заморожена в соломинках или пайетах в дозе 0,2-0,25 мл, ее оттаивают в термосе или термостате при t воды = 38ºС в течение 9-10 сек. Соломинку вынимают и очищают от воды, осторожно заворачивают в бумажную салфетку и промакивают.

    Осеменение визоцервикальным способом

    Для этого способа используются 4 пронумерованные стеклянные баночки (№1,2,3,4) на 100 мл с притертыми крышками. В банки №1,3,4 наливают стерильный 15 раствор натрия хлорида (можно 2,8% раствор цитрата натрия), в банку №2 - 70% этиловый спирт; раствор в банках №3 и 4 должен быть теплым (38-40ºС), чтобы шприц-катетер нагревать перед наполнением его спермой. Шприц отмывают раствором по 3-4 раза из банки №1 и после обеззараживания 70% этиловым спиртом из банки №2 моют раствором из банок №3 и 4 (удаляя остатки спирта)

    Набрав сперму, шприц держат вертикально, катетером вверх. Подготовленное влагалищное зеркало, увлажненное теплым (38-40ºС) стерильным 1% раствором хлорида натрия, вводят во влагалище самки (предварительно наружные половые органы обрабатывают теплой водой, раствором фуразолидона, высушивают салфеткой или ватой. Вводят влагалищное зеркало, поворачивают ручками вниз, осторожно раскрывают бранши и, отыскав шейку матки вводят в нее канал шприц-катетер или осеменительную пипетку на глубину 4-6 см.

    Осеменение ректоцервикальным способом

    Перед осеменением инструменты готовят следующим образом:

    Уголок пакета с одноразовыми стерильными пипетками протирают тампоном, смоченным 96% спиртом и прорывают пипеткой;

    Выдвинув пипетку на 1/3 длины ее соединяют со шприцем и извлекают из пакета.

    Если используется сперма замороженная в пайетах, то используется специальный инструмент состоящий из чехла, металлического цилиндра с поршнем, длиной45 сми фиксационной пружины. Пакет с защитными чехлами также обрабатывают тампоном смоченным этиловым спиртом, отрезают уголок пакета, на предварительно подготовленный шприц со вставленной пайетой надевают защитный чехол и фиксируют пружиной (перед этим отрезают кончик пайеты, направленный наружу).

    Подготовленные для осеменения инструменты кладут на специальную подставку. Каплю спермы выдавливают на предметное стекло и обязательно проверяют под микроскопом на активность.

    Перед осеменением коровы (телки) надевают одноразовую перчатку на руку, увлажняют ее теплой водой (лучше мыльной) и раскрывают наружные половые органы коровы, а другой рукой вводят пипетку или осеменительный инструмент с пайетой под углом 25-35º во влагалище до шейки матки. Затем руку в полиэтиленовой перчатке вводят в прямую кишку и находят шейку матки, фиксируя ее между указательным и средним пальцами. Большим пальцем или мизинцем направляют инструмент в канал шейки матки на глубину 6-8 см, медленно надавливают на поршень шприца или выталкиватель спермы из пайеты.

    Осеменение маноцервикальным способом

    Изначально, как это принято при любом способе, проводится тщательный туалет наружных половых органов коровы. Далее достают ампулы со спермой из термоса или оттаивают их, если она хранилась в жидком азоте, протирают спиртовым тампоном, стерильными ножницами срезают колпачок ампулы, выдавливают каплю спермы на предметное стекло, чтобы оценить активность. Затем соединяют ампулу с катетером. Не вынимая из полиэтиленового пакета.

    Надевают на руку перчатку, увлажняют теплым 1% раствором натрия хлорида, вводят руку во влагалище коровы, нащупав шейку матки определяют ее состояние. Затем руку отводят до преддверия влагалища, другой рукой подают подготовленную ампулу с катетером в руку, находящуюся во влагалище, вставляют катетер в канал шейки матки на глубину 4-6 см. выдавливают сперму большим и указательным пальцами от донышка ампулы по направлению к катетеру. Не разжимая ампулы, осторожно вынимают катетер из канала и делают легкий массаж шейки матки

    ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ ОВЕЦ И КОЗ

    Овец и коз осеменяют визоцервикальным способом разбавленной или неразбавленной спермой на пунктах искусственного осеменения, как свежеполученной (сохраненной при температуре 2-4ºС в течение 2-х суток с активностью не ниже 8 баллов), так и замороженной при температуре -196ºС (после оттаивания активность спермиев должна быть не ниже 4 баллов).

    Козу или овцу заводят в станок и обрабатывают наружные половые органы салфеткой, смоченной раствором фурациллина 1:500. Перед осеменением при помощи стерильного теплого влагалищного зеркала осматривают влагалище самки, чтобы проверить, нет ли у нее признаков заболевания - сыпи, крови, гноя. Приоткрывают бранши у шейки матки. Затем катетер шприца вводят в канал шейки матки на глубину 1-2 сми надавливают на поршень большим пальцем руки, чтобы сперма не вытекала во влагалище перед нажатием на поршень зеркало слегка оттягивают назад. Перед осеменением следующей овцы (козы) катетер шприца протирают тампоном, пропитанным 96%-ным спиртом так, чтобы спирт не попал в канюлю.

    Влагалищное зеркало после каждой овцы моют теплым 2-3% раствором бикарбоната натрия, насухо вытирают и обеззараживают (фламбируют). Когда вся сперма израсходована, перед наполнением микрошприца спермой от другого барана (козла) шприц промывают 1%-ным раствором хлорида натрия (баночка №1), затем 70%-ным спиртом (баночка №2) и отмывают спирт (из баночек №3 и №4).

    После работы шприцы-катетеры моют теплой водой и стерилизуют кипячением (можно в шприце оставлять 70% спирт до следующего осеменения).

    Овец (коз) осеменяют двукратно в одну охоту. Половую охоту выявляют бараном-пробником 2 раза в сутки - утром и вечером. Овец, у которых охота продолжается более суток, нужно осеменять двукратно: первый раз сразу после выборки и второй раз через сутки (после каждого осеменения овец метят легко смывающейся краской на крупе). Овец и коз, у которых трудно обнаружить шейку матки, можно осеменять влагалищным способом (парацервикально) Шприц-катетер с укороченным концом глубоко вводят во влагалище самки и выдавливают неразбавленную сперму в дозе 0,1 мл, разбавленную - в дозе 0,2 мл.

    Из осемененных овец формируют новую отару и с 12 дня после осеменения бараном-пробником выбирают овец, пришедших в повторную охоту.

    ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ СВИНЕЙ

    В отличие от искусственного осеменения крупного рогатого, где в основном используется привозная размороженная сперма, в свиноводстве производителей очень часто содержат в хозяйствах. Поэтому для организации осеменения сначала от хряка получают сперму. Как правило режим взятия один раз в 5-7 дней.

    В том случае, если сперму собираются использовать в течение продолжительного времени, ее необходимо замораживать. Поэтому после взятия ее отфильтровывают от секрета куперовых желез. Фильтрат выдерживают в темноте при температуре 18-20ºС в течение 60 мин. Для замораживания используют эякулят с активностью спермиев не менее 7 баллов и концентрацией не менее 150 млн/мл.

    После часовой выдержки при t 18-20 ºС сперму подогревают до 30 ºС, разбавляют в отношении 1:1 подогретой до этой же температуры средой. Затем сперму выдерживают дополнительно при t 18-20 ºС в течение 4 часов, после чего помещают в холодильник (10 ºС) и спустя 30 мин. Колбу со спермой переносят на 10-15 мин в тающий лед с водой (0 ºС).

    Если сперму замораживают в гранулах на блоке сухого льда, диаметр лунок1 см, объем гранул 0,5 мл спустя 5 мин гранулы переносятся в жидкий азот для хранения.

    Гранулы размораживают в специальном устройстве с водой подогретой до t 42-43 ºС. С помощью устройства отделяют жидкую фазу спермы от твердой в момент ее образования.

    Активность спермиев составляет около 4-5 баллов. Свиноматок осеменяют дважды в одну охоту дозой 100 мл, содержащей 3-5 млрд. подвижных спермиев.

    Сперму хряков при осеменении свиней вводят непосредственно в матку. Во время использования сперма должна быть t 30-35 ºС, т.к. холодная сперма вызывает сокращение матки и выбрасывается во влагалище свиньи и наружу. В наше время широко используются полиэтиленовые приборы ПОС-5.

    Свиней осеменяют на пунктах в индивидуальных станках-клетках или непосредственно в станках, где они содержатся. Наружные половые органы самки обрабатывают раствором фурациллина 1:5000. катетер во влагалище свиньи вводят без влагалищного зеркала до упора в шейку матки на глубину 25-30 сми затем непосредственно в шейку матки (которая периодически сокращается), поэтому вливать сперму в матку надо в течение 3-4 мин. Доза спермы - 1 мл на1 кгживой массы животного, но не более 150 мл (3-5 млрд. активных спермиев). Фракционный способ искусственного осеменения свиней заключается во введении в матку сначала малоразбавленной (1:1) или неразбавленной спермы в объеме 40-50 мл (2-3 млрд. подвижных спермиев) , а затем разбавителя (глюкозо-солевого) - 70-100 мл. Для этого способа применяют специальный зонд УЗК-5, состоящий из металлического катетера с головкой на конце, который соединяют с флаконами для спермы и разбавителя. Флаконы соединены резиновыми трубками с шарами Ричардсона. Флаконы на 100-250 мл помещают в деревянные ящики с подогревом. После введения зонда в матку открываю флакон со спермой и при помощи шаров Ричардсона воздухом вытесняют необходимую дозу спермы в канал шейки матки; флакон со спермой закрывают, открывают флакон с разбавителем и вводят определенную дозу.

    Половую охоту у свиноматок выявляют утром и вечером с помощью хряка-пробника в специально выделенных для этого станках или двориках (рефлекс неподвижности). Свиноматок в состоянии охоты осеменяют сразу же и затем повторно через 20-24 часа.

    ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ КОБЫЛ

    Подготовка к осеменению кобылы всегда сопровождается дополнительными мероприятиями по предупреждению травматизма. Поэтому для начала кобылу заводят в станок или удерживают за повод, кроме того, во время введения спермы кобыле поднимают переднюю конечность, чтобы она не могла ударить задней. Предварительно корень хвоста забинтовывают. Конюх отводит хвост кобылы в сторону и обмывает наружные половые органы из кружки Эсмарха раствором фурациллина 1:5000. осеменяют кобыл двумя способами: визоцервикальным и маноцервикальным. Сперму вводят непосредственно в матку (на глубину 10-20 см) применяется резиновый, эбонитовый или полистероловый катетер.

    Искусственное осеменение кобыл может быть проведено двумя способами.

    Для маноцервикального способа используют резиновый и полистероловый катетеры. Подготовленную руку ветспециалист вводит во влагалище кобылы, конец катетера, продвигает через шейку в тело матки; помощник поднимает шприц или ампулу и вводит сперму.

    Для визоцервикального способа осеменения используют как эбонитовый, так и полистероловый катетер конструкции ВНИИ коневодства. Катетер представляет собой трубку длиной50 сми толщиной0,6 см, один конец которой расширен в виде головки. Катетер соединяют со шприцем или ампулой резиновой муфтой с хомутиком. Катетер используют одновременно с влагалищным зеркалом, которое стерилизуют и увлажняют 0,9% раствором NaСl.

    Осеменяют кобыл свежеполученной или сохраненной при t 2-4ºС в течение 3 суток или размороженной. При оттаивании спермы, замороженной в алюминиевых пакетах, их быстро переносят пинцетом из жидкого азота на 1 минуту в водяную баню t 40ºС. Доза свежеполученной спермы -25-30 мл. В дозе должно быть не менее 150-300 млн спермиев с ППД. Активность свежеполученной спермы не ниже 6 баллов, оттаянной - 2 балла.

    Сперму вводят только подогретой до t 30-35ºС. Осемененных кобыл через 8-9 дней проверяют жеребцом-пробником на наличие половой охоты. Через 35-40 дней после осеменения кобыл проверяют на жеребость ректальным методом.

    ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ ПТИЦ

    Осеменение птицы организуют во второй половине дня (после яйцекладки): кур - 1 раз в 5 дней, гусынь - 1 раз в день и индеек в начале сезона 2-3 раза с интервалом 1-2 дня, затем 10-12 дней.

    Для эффективности процесса осеменения работу бригад, делят на 2 группы. Первая группа (2 человека) получает сперму от петухов, вторая (2-3 человека) осеменяет кур. За 1 час можно осеменить 120-150 кур. Помощник держит курицу левой рукой, а правой надавливает ей слегка на живот в области между лонными костями и грудной клеткой, где расположен яйцепровод. При этом клоака птицы слегка вытягивается. Левой рукой ветспециалист слегка растягивает клоаку ватным тампоном, смоченным раствором фурациллина 1:5000, пока не покажется отверстие яйцепровода, расположенное несколько слева. Правой рукой вводит в яйцепровод катетер на глубину 4-5 сми выдавливает дозу спермы.

    Доза составляет 0,02, 0,03 и 0,05 мл и содержание спермиев не менее 10 -15 млн, активностью 7 баллов.

    ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ КРОЛЬЧИХ

    Основная особенность искусственного осеменения крольчих состоит в том, что овуляция у них происходит только в результате раздражения рецепторов влагалища. Поэтому крольчиху сначала спаривают с вазэктомированным самцом. Затем фиксируют на специальном станке спиной вниз. Ватным тампоном, увлажненным раствором фурациллина 1:5000 обрабатывают наружные половые органы самки. Набирают в шприц-катетер (можно использовать укороченный для осеменения овец) свежеразбавленную сперму (0,3 мл) или сохраненную в течение 5-6 часов при t 0ºС (0,4 мл) с оценкой не ниже 6 баллов и содержанием 5-10 млн спермиев в дозе. Можно использовать сперму, размороженную в термостате при t 38ºС, в дозе 1 мл с активностью 3 балла, содержащую не менее 4,5 млн подвижных спермиев.

    Во время осеменения пальцами левой руки слегка раздвигают половую щель самки, а правой рукой вводят шприц-катетр, направляя сначала вниз, а затем во влагалище, за лонным сращением его поворачивают параллельно оси позвоночника самки. При введении шприца нельзя допускать резких движений. Иногда шприц-катетер трудно проходит во влагалище в результате спазма. В этом случае надо сделать паузу, после чего катетер вводят на 12-14 сми впрыскивают сперму у шеек маток (двойной тип матки).